Fenylgalaktosid, även känd som p-nitrofenyl β-D-galaktopyranosid (pNPG), är ett syntetiskt substrat som ofta används i biokemiska och molekylärbiologiska experiment.Det används vanligtvis för att detektera och mäta aktiviteten av enzymet β-galaktosidas.
När fenylgalaktosid hydrolyseras av β-galaktosidas frisätter den p-nitrofenol, som är en gulfärgad förening.Frigörandet av p-nitrofenol kan mätas kvantitativt med en spektrofotometer, eftersom absorbansen av p-nitrofenol kan detekteras vid en våglängd av 405 nm.