IPTG CAS:367-93-1 Tillverkarens pris
Isopropyl β-D-1-tiogalaktopyranosid (IPTG) är en syntetisk analog av laktos som vanligtvis används i molekylärbiologisk forskning och bioteknologiska tillämpningar.IPTG används främst för att inducera uttrycket av gener i bakteriella system, där det fungerar som en molekylär trigger för att initiera transkriptionen av målgener.
När det tillsätts till tillväxtmediet, tas IPTG upp av bakterierna och kan binda till lac-repressorproteinet, vilket hindrar det från att blockera aktiviteten hos lac-operonet.Lac-operonet är ett kluster av gener som är involverade i laktosmetabolism, och när repressorproteinet tas bort uttrycks generna.
IPTG används ofta i kombination med lacUV5-mutantpromotorn, som är en konstitutivt aktiv version av lac-promotorn.Genom att kombinera IPTG-induktion med denna mutanta promotor kan forskare uppnå höga nivåer av genuttryck.Detta möjliggör produktion av stora mängder protein för rening eller andra nedströmsapplikationer.
Förutom genuttryck används IPTG också ofta i blå/vita screeninganalyser.I denna teknik är lacZ-genen typiskt sammansmält med en gen av intresse, och bakterier som framgångsrikt uttrycker denna fusionsgen kommer att producera ett aktivt β-galaktosidasenzym.När IPTG tillsätts tillsammans med ett kromogent substrat som X-gal blir bakterier som uttrycker fusionsgenen blåa på grund av aktiviteten av β-galaktosidas.Detta möjliggör identifiering och urval av rekombinanta stammar som framgångsrikt har integrerat genen av intresse.
Induktion av genuttryck: IPTG används vanligtvis för att inducera uttrycket av målgener i bakteriella system.Det härmar den naturliga induceraren laktos och binder till lac-repressorproteinet, vilket förhindrar att det blockerar lac-operonet.Detta möjliggör transkription och uttryck av de önskade generna.
Proteinuttryck och rening: IPTG-induktion används ofta för att producera stora mängder rekombinanta proteiner för olika ändamål, såsom biokemiska studier, terapeutisk produktion eller strukturanalys.Genom att använda lämpliga uttrycksvektorer och IPTG-induktion kan forskare uppnå höga nivåer av målproteinproduktion i bakterievärdar.
Blå/vit screening: IPTG används ofta i kombination med lacZ-genen och ett kromogent substrat, såsom X-gal, för blå/vit screeninganalyser.lacZ-genen är typiskt sammansmält med genen av intresse, och bakterier som framgångsrikt uttrycker denna fusionsgen kommer att producera ett aktivt β-galaktosidasenzym.När IPTG och det kromogena substratet tillsätts blir rekombinanta stammar som uttrycker fusionsgenen blå, vilket möjliggör enkel identifiering och selektion.
Studie av genreglering: IPTG-induktion används ofta i forskning för att studera regleringen av gener och operoner, särskilt lac-operonet.Genom att manipulera koncentrationerna av IPTG och övervaka uttrycket av lac-operonkomponenter kan forskare undersöka mekanismerna för genreglering och olika faktorers eller mutationers roll.
Genexpressionssystem: IPTG är en avgörande komponent i flera genuttryckssystem, såsom de T7-promotorbaserade systemen.I dessa system används lac-promotorn ofta för att driva uttrycket av T7-RNA-polymeras, som i sin tur transkriberar målgener under kontroll av T7-promotorsekvenser.IPTG används för att inducera uttryck av T7 RNA-polymeras, vilket leder till aktivering av målgenuttryck.
| Sammansättning | C9H18O5S |
| Analysera | 99 % |
| Utseende | vitt pulver |
| CAS-nr. | 367-93-1 |
| Förpackning | Liten och bulk |
| Hållbarhetstid | 2 år |
| Lagring | Förvaras svalt och torrt |
| Certifiering | ISO. |
