Fenylgalaktosid CAS:2818-58-8

Effekt på enzymaktivitet: Fenylgalaktosid används vanligtvis för att mäta aktiviteten av enzymet β-galaktosidas.När fenylgalaktosid hydrolyseras av β-galaktosidas frisätter den p-nitrofenol.Ackumuleringen av p-nitrofenol kan mätas kvantitativt, vilket ger insikter om aktiviteten av β-galaktosidas.Denna effekt utnyttjas i applikationer som enzymanalyser och screeningsystem.

Analys av genuttryck: Fenylgalaktosid används ofta som ett substrat i molekylärbiologiska experiment för att studera genuttryck.lacZ-genen, som kodar för β-galaktosidas, är vanligen sammansmält med regulatoriska sekvenser av andra gener av intresse.Expressionen av lacZ-genen och hydrolysen av fenylgalaktosid av β-galaktosidas kan indikera uttrycksmönstret och nivån för målgenen som studeras.

Screeningsystem: Fenylgalaktosid är en viktig komponent i screeningsystem som använder β-galaktosidasaktivitet.Ett allmänt känt exempel är den blå-vita screeningsmetoden, som används för att identifiera rekombinanta eller transformerade celler i molekylärbiologiska experiment.Kolonier som framgångsrikt har tagit upp det rekombinanta DNA:t eller genomgått genetisk rekombination kommer att uttrycka β-galaktosidas, vilket leder till hydrolys av fenylgalaktosid och bildandet av en blå färg.

Proteinrening: I vissa fall kan fenylgalaktosid användas som en ligand för affinitetskromatografi för att rena proteiner som specifikt binder till eller aktiveras av β-galaktosidas.Proteinet av intresse kan ha en affinitetsmarkör eller en fusionsmarkör innehållande en p-galaktosidasbindande domän.Genom att passera proteinblandningen genom en kolonn med immobiliserad fenylgalaktosid kan det önskade proteinet selektivt bibehållas och därefter elueras.